Séance de cours

Chromatographie liquide haute performance : les bases

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Dans cours

CH-301: Méthodes de séparation analytiques

Les étudiants comprennent les bases physico-chimiques des méthodes de séparation chromatographiques et électrophorétiques. ...

Description

Cette séance de cours présente les bases de la chromatographie liquide haute performance (HPLC), une méthode utilisée pour séparer les molécules en fonction de leur masse molaire. La CLHP est préférée à la chromatographie sur colonne pour sa sélectivité et sa résolution améliorées, en particulier pour les molécules thermiquement instables ou non volatiles. La séance de cours couvre les principes de la chromatographie HPLC, y compris le rôle des éluants, des pompes, des injecteurs et des colonnes chromatographiques. Il explique les facteurs influençant la rétention du soluté, tels que la température de la colonne, le diamètre des particules et la polarité de l'éluant. Différents modes d'élution, isocratiques et dégradés, sont discutés, ainsi que leur impact sur l'efficacité et la résolution de la séparation.

Enseignant·e

Christophe Roussel

Habilitation à Diriger les Recherches (HDR) in chemistry at the Ecole Normale Supérieure Paris-Saclay (Cachan, France)PhD Thesis in physical organic chemistry at the University of Bourgogne Franche-Comté (Besançon, France) / Ecole Normale Supérieure Paris-Saclay (Cachan, France)

Source officielle

Concepts associés (19)

Chromatographie sur colonne

thumb|Chromatographie sur colonne dans un laboratoire de la Food and Drug Administration dans les années 1950. La chromatographie sur colonne est fondée sur le même principe que la chromatographie sur couche mince, sauf que la silice ne se trouve pas sur une plaque mais dans une colonne. Cette technique est très utilisée dans la purification en chimie organique. La séparation des composés est provoquée par l'écoulement continu d'un éluant passant dans la colonne par gravité ou sous l'effet d'une faible pression.

Chromatographie

La chromatographie est une méthode physico-chimique qui sert à séparer les différentes substances présentes dans un mélange (échantillon en phase homogène liquide ou gazeuse). vignette|458x458px|Chromatographie sur couche mince faisant apparaître les composants d'une plante verte, comme la chlorophylle. Il est probable que la séparation de pigments inspira le nom de la méthode. L'appareil utilisé pour effectuer certaines chromatographies se nomme chromatographe. L'image ou le diagramme obtenu par chromatographie est appelé chromatogramme.

Élution

L'élution est un procédé permettant de mettre en solution (dite éluée) un composé adsorbé à l'aide d'un solvant (ou un chélateur) nommé l'éluant. L'élution est notamment utilisée en chromatographie en phase liquide et en chromatographie sur couche mince (CCM), par exemple pour les analyses de sols. Elle est également utilisée en immuno-hématologie pour récupérer, dans un éluat, un anticorps fixé spécifiquement sur des hématies. Une élution isocratique est une élution au cours de laquelle la composition de la phase mobile n'est pas modifiée au cours du temps.

Chromatographie en phase gazeuse

La chromatographie en phase gazeuse (CPG) est une technique de chromatographie qui permet de séparer des molécules d'un mélange gazeux, éventuellement très complexe, de natures très diverses. Elle s'applique principalement aux composés gazeux ou susceptibles d'être vaporisés par chauffage sans décomposition. Elle est de plus en plus utilisée dans les principaux domaines de la chimie, ainsi qu'en parfumerie et en œnologie.

Chromatographie en phase liquide-spectrométrie de masse

La chromatographie en phase liquide couplée à la spectrométrie de masse (en anglais Liquid chromatography-mass spectrometry ou LC-MS) est une méthode d'analyse qui combine les performances de la chromatographie en phase liquide et de la spectrométrie de masse afin d'identifier et/ou de quantifier précisément de nombreuses substances. Une unité LC-MS est composée de deux blocs principaux : un chromatographe en phase liquide et un spectromètre de masse. Catégorie:Méthode de la biochimie Catégorie:Chromatogra

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