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Séance de cours

Photochimie I : colorants Xanthène et mécanismes de transfert d'énergie

Description

Cette séance de cours couvre les propriétés et les structures des colorants au xanthène, y compris la fluorescéine et le tétrachlorofluoroscéine, ainsi que leurs applications en photochimie. Il traite également du couplage spin-orbite, de la loi sur l'écart énergétique et de l'extinction des émissions par la relation Stern-Volmer. En outre, il explore les mécanismes de transfert d'énergie électronique intermoléculaire, tels que le transfert d'énergie par résonance Förster (FRET) et l'échange d'électrons Dexter, et leur impact sur l'extinction par fluorescence.

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Concepts associés (32)

Transfert d'énergie entre molécules fluorescentes

Le transfert d'énergie entre molécules fluorescentes ou transfert d'énergie par résonance de type Förster (en anglais, Förster resonance energy transfer ou FRET, resonance energy transfer ou RET ou electronic energy transfer ou EET), bien qu’observé par Perrin au début du , est décrit pour la première fois par Theodor Förster en 1946. Les applications de cette approche à l’étude des interactions protéiques apparaîtront vers la fin du . vignette|Figure 1. Conditions du FRET. A.

Fluorochrome

Un fluorochrome ou fluorophore est une substance chimique capable d'émettre de la lumière de fluorescence après excitation. Ce sont des substances composées de plusieurs noyaux aromatiques conjugués ou encore des molécules planes et cycliques qui possèdent une ou plusieurs liaisons π. L'utilisation de fluorochromes en biologie moléculaire est un peu plus récente que celle d'isotopes radioactifs. Elle a l'avantage de donner des résultats très rapidement, voire immédiatement, en s'affranchissant des longs temps d'exposition requis pour la technique par radioactivité.

DyLight Fluor

The DyLight Fluor family of fluorescent dyes are produced by Dyomics in collaboration with Thermo Fisher Scientific. DyLight dyes are typically used in biotechnology and research applications as biomolecule, cell and tissue labels for fluorescence microscopy, cell biology or molecular biology. Historically, fluorophores such as fluorescein, rhodamine, Cy3 and Cy5 have been used in a wide variety of applications.

Fluorescence

La fluorescence est une émission lumineuse provoquée par l'excitation des électrons d'une molécule (ou atome), généralement par absorption d'un photon immédiatement suivie d'une émission spontanée. Fluorescence et phosphorescence sont deux formes différentes de luminescence qui diffèrent notamment par la durée de l'émission après excitation : la fluorescence cesse très rapidement tandis que la phosphorescence perdure plus longtemps. La fluorescence peut entre autres servir à caractériser un matériau.

Quenching

vignette|Démonstration du quenching : deux solutions de quinine sont soumises à un laser violet. L'échantillon de droite montre la fluorescence de la quinine, dans le bleu. Dans l'échantillon de gauche ont été ajoutés des ions chlorure : ils « éteignent » la fluorescence de la quinine. En photochimie, le quenching (du terme anglais pour "extinction") regroupe l'ensemble des phénomènes qui contribuent à diminuer l'intensité de la fluorescence d'une substance donnée.

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