Publication

Transfection using plasmid preparations

Florian Maria Wurm
2002
Patents

Résumé

There is provided a method for plasmid DNA extraction to reproducibly yield relatively crude preparation which is suitable for transfection into mammalian cells. The inventors have determined that the high level of purification previously thought to be necessary in order to successfully allow transfection of the plasmid DNA into cells is not required. The inventors have developed a method of producing a transfectable plasmid preparation that can be performed on a large scale that avoids the use of specialized equipment and reagents.

Source officielle

https://infoscience.epfl.ch/entities/publication/ecef420b-c5b5-4aa1-8f52-792fd014f81a

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Florian Maria Wurm
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Concepts associés (32)

Plasmide

vignette|Schéma représentant une bactérie contenant des plasmides. En microbiologie et en biologie moléculaire, un plasmide est une molécule d'ADN distincte de l'ADN chromosomique, capable de réplication autonome et non essentielle à la survie de la cellule. Les plasmides sont bicaténaires (constitués de deux brins complémentaires) et généralement circulaires. On les trouve presque exclusivement dans les bactéries et parfois dans d'autres micro-organismes comme le plasmide 2Mu que l'on trouve dans la levure Saccharomyces cerevisiae (levure de boulangerie), un eucaryote unicellulaire.

Transfection

On appelle transfection le processus de transfert de gènes, c'est-à-dire l'introduction de matériel génétique exogène dans des cellules eucaryotes, n’utilisant pas comme vecteur un virus, par opposition à la transduction. À noter que le terme « transfection » est assez analogue au processus de transformation bactérien, mais ce terme n'a pas été appliqué aux cellules animales, du fait de son association à un phénotype altéré et une croissance anarchique (en clair, d'un stade précancéreux).

Molecular cloning

Molecular cloning is a set of experimental methods in molecular biology that are used to assemble recombinant DNA molecules and to direct their replication within host organisms. The use of the word cloning refers to the fact that the method involves the replication of one molecule to produce a population of cells with identical DNA molecules. Molecular cloning generally uses DNA sequences from two different organisms: the species that is the source of the DNA to be cloned, and the species that will serve as the living host for replication of the recombinant DNA.

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