Publication

Large-scale transient expression in mammalian cells for recombinant protein production

Florian Maria Wurm
1999
Journal Articles

Résumé

Large-scale transient expression from mammalian cells is a new technology. Breakthroughs have been achieved for non-viral delivery methods: transfections can now be done at the 1-10 L scale with mammalian cells grown in suspension. Production of 1-20 mg/L of recombinant protein have been obtained in stirred bioreactors. Modified alphaviruses have provided a fast and efficient expression technology based on viral vectors.

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Florian Maria Wurm
1999
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Protein production

Protein production is the biotechnological process of generating a specific protein. It is typically achieved by the manipulation of gene expression in an organism such that it expresses large amounts of a recombinant gene. This includes the transcription of the recombinant DNA to messenger RNA (mRNA), the translation of mRNA into polypeptide chains, which are ultimately folded into functional proteins and may be targeted to specific subcellular or extracellular locations.

Acide désoxyribonucléique recombinant

L'acide désoxyribonucléique recombinant (ADN recombinant ou ADN recombiné) est une molécule d'acide désoxyribonucléique créée en laboratoire composée de séquences nucléotidiques provenant de plusieurs sources créant ainsi des séquences qui n'existent pas dans les organismes vivants. Paul Berg César Milstein Werner Arber La technologie recombinante est maintenant largement utilisée dans des projets de recherches ou de développement.

Vecteur viral

Les vecteurs viraux sont des outils couramment utilisés en biologie moléculaire pour délivrer un gène d’intérêt à l'intérieur de cellules. Ce procédé peut être utilisé sur un organisme vivant () ou sur des cellules maintenues en culture (). L'évolution a permis aux virus de développer des mécanismes spécifiques et particulièrement efficaces pour incorporer leur génome à l'intérieur des cellules qu'ils infectent. Ce mécanisme d'incorporation de matériel génétique (ADN ou ARN) s'appelle la transduction.

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Expression of Herpes simplex virus type 1 glycoprotein C antigens in Escherichia coli