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Cette séance de cours couvre les principes et les applications de la microscopie à fluorescence par réflexion interne totale (TIRFM). Il explique comment TIRFM utilise les ondes évanescentes pour exciter sélectivement les fluorophores près de la surface de la lisière, fournissant des images à contraste élevé. La séance de cours traite des limites de la microscopie à fluorescence conventionnelle et des conditions requises pour la réflexion interne totale (TIR). Il explore également le concept d'ondes évanescentes dans TIR, la profondeur de pénétration de l'onde évanescente et diverses techniques de microscopie à fluorescence. En outre, il approfondit les détails de la méthode de récupération de fluorescence après photoblanchiment (FRAP), de ses applications, de son analyse cinétique et de son équipement. La séance de cours se termine par des exemples d'expériences FRAP et la mesure des coefficients de diffusion à l'aide de FRAP.