Séance de cours

Systèmes d'expression des protéines

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Dans cours

CH-319: Experimental biochemistry and biophysics

A 7-week long (4+8 h) experiment where you plan and construct a fluorescent sensor protein starting from DNA bricks. The protein will be expressed in and purified from E.coli, characterized by biochemical and spectroscopic methods. Your report will be in ...

Description

Cette séance de cours couvre le processus d'expression des protéines, de la conception vectorielle à la sélection des systèmes d'expression. Il traite de l'utilisation de E. coli BL21 (DE3) pour l'expression des protéines, des considérations de conception vectorielle et des méthodes pour augmenter la solubilité des protéines. La séance de cours explore également les avantages et les inconvénients de l'utilisation d'E. coli comme système d'expression, ainsi que d'autres systèmes communs tels que les mammifères, les insectes, les levures, les bactéries et les systèmes sans cellules. Différents partenaires de fusion, marqueurs de sélection et vecteurs d'expression sont présentés, ainsi que des exemples pratiques d'expression de protéines dans les cellules d'E. coli et d'insectes.

Enseignant·e

Rudolf Hovius

Expertise Protein structure, expression & purificationÂ•Molecular interaction & receptor activationÂ•Fluorescence imaging & spectroscopySignalling & sensing Mission => Teaching: Lecture courses, tutorials and practicals in biochemistry, biophysical chemistry of membranes and signalling processes. Participating to the Commission d'Enseignement and Commission de l'Ecole Doctorale of Chemistry and Chemical Engineering.=> Research interests: Protein function and structure, Membrane protein (especially receptors

Source officielle

Concepts associés (32)

Expression vector

An expression vector, otherwise known as an expression construct, is usually a plasmid or virus designed for gene expression in cells. The vector is used to introduce a specific gene into a target cell, and can commandeer the cell's mechanism for protein synthesis to produce the protein encoded by the gene. Expression vectors are the basic tools in biotechnology for the production of proteins. The vector is engineered to contain regulatory sequences that act as enhancer and promoter regions and lead to efficient transcription of the gene carried on the expression vector.

Expression génétique

L'expression des gènes, encore appelée expression génique ou expression génétique, désigne l'ensemble des processus biochimiques par lesquels l'information héréditaire stockée dans un gène est lue pour aboutir à la fabrication de molécules qui auront un rôle actif dans le fonctionnement cellulaire, comme les protéines ou les ARN. Même si toutes les cellules d'un organisme partagent le même génome, certains gènes ne sont exprimés que dans certaines cellules, à certaines périodes de la vie de l'organisme ou sous certaines conditions.

Protein production

Protein production is the biotechnological process of generating a specific protein. It is typically achieved by the manipulation of gene expression in an organism such that it expresses large amounts of a recombinant gene. This includes the transcription of the recombinant DNA to messenger RNA (mRNA), the translation of mRNA into polypeptide chains, which are ultimately folded into functional proteins and may be targeted to specific subcellular or extracellular locations.

Régulation de l'expression des gènes

La régulation de l'expression des gènes désigne l'ensemble de mécanismes mis en œuvre pour passer de l'information génétique incluse dans une séquence d'ADN à un produit de gène fonctionnel (ARN ou protéine). Elle a pour effet de moduler, d'augmenter ou de diminuer la quantité des produits de l'expression des gènes (ARN, protéines). Toutes les étapes allant de la séquence d'ADN au produit final peuvent être régulées, que ce soit la transcription, la maturation des ARNm, la traduction des ARNm ou la stabilité des ARNm et protéines.

Chromosome artificiel de levure

Les chromosomes artificiels de levure (YAC, en anglais : yeast artificial chromosomes) sont très utilisés dans les techniques de biologie moléculaire et le sont, parfois, en génétique. Ils contiennent au moins une origine de réplication (ou ARS pour autonomously replicating sequence), un centromère et des télomères provenant de la levure Saccharomyces cerevisiae. De plus ils contiennent habituellement des gènes permettant leur sélection dans une population de levures.

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Séances de cours associées (57)

Expression et purification des protéines

Explore l'expression des protéines, la purification et la filtration sur gel pour isoler les complexes protéiques.

Synthèse protéique : Expression recombinante

Explore la synthèse des protéines, le code génétique, la transcription, la traduction et l'expression des protéines recombinantes à l'aide de vecteurs et de plasmides.

ADN: PCR et techniques de séquençage

Explore l'ingénierie de l'ADN à travers la PCR, le séquençage Sanger, le projet du génome humain, l'ADN recombinant, la manipulation de l'ADN bactérien et CRISPR / Cas9.

Biochimie expérimentale et biophysique: génie génétique et capteurs FRET

Initie les étudiants au génie génétique, aux capteurs FRET, à la caractérisation des protéines et à la sécurité en laboratoire en biochimie et en biophysique.

Chromatographie des protéines: Techniques de purification

Explore les méthodes de chromatographie des protéines, y compris la purification par affinité et l'élimination des étiquettes, pour des processus de purification des protéines efficaces.

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